Esterilización al baño maría
Este método, aunque no es tan bueno como usar una olla a presión o autoclave, es perfectamente válido, aunque funciona con grano de arroz sólo se recomienda para vasos PFTek (harina de arroz con vermiculita). Es conveniente dejar el grano en agua previamente a la esterilización durante 24 horas para que germinen las endoesporas y éstas no resistan la esterilización.
Sellado de los vasos
Una vez que tenemos el sustrato listo para esterilizar lo echamos en los vasos sin llenar del todo. Cubrimos la boca del vaso con papel de aluminio, echamos algo de vermiculita seca y ponemos otra nueva capa de papel de aluminio. Esta técnica es conocida como Sello Ramsey y ayuda a prevenir contaminaciones a la hora de inocular.
Es importante que el vaso quede bien cerrado para que no entre agua durante el proceso.
Esterilización
Preparamos una olla normal y corriente poniendo un trapo en el fondo para evitar que se rompan los vasos al hervir, colocamos los vasos y echamos agua, comprobando que el nivel del agua cubra el nivel del sustrato de los vasos. Es posible que tengamos que rellenar con un poco de agua hirviendo cuando pase una hora aproximadamente para que el nivel no baje demasiado. Se debe estar al tanto para evitar que salgan ardiendo los trapos.
Cubrimos con una tapa, lo dejamos una hora y cuarto – hora y media al baño maría, apartamos del fuego, sacamos los vasos y los dejamos enfriar completamente antes de inocular. Es importante que se terminen de enfriar, dependiendo del tamaño de estos pueden estar frios al tacto por fuera mientras que el sustrato está demasiado caliente, matando las esporas.
Para esterilizar grano se recomienda un tiempo de 8 horas, teniendo una olla con agua caliente accesoria para ir rellenando conforme se evapore, aunque siempre es mejor esterilizar con olla a presión.