Tarros en olla a presión
Esterilizar en olla a presión es muy sencillo. Hay que echar al fondo de la olla una cantidad de agua (consultar instrucciones), poner la cubeta de la olla y encima los tarros, cubriendo la parte superior con papel de aluminio; esto es importante para que el perlón no se moje y para que no de el vapor directamente sobre la silicona del puerto de inyección.
Se recomienda comprobar que sale gas de la olla por seguridad. Consulta las instrucciones de la olla.
Es importante tener en cuenta que esta esterilización no es completa, tan solo da un margen de tiempo para que crezca el micelio antes que los contaminantes. Por esta razón los tarros esterilizados no pueden ser conservados indefinidamente para inocular en un futuro.
La olla se pone a máximo fuego hasta que alcanza máxima presión, entonces ponemos el fuego al mínimo.
Tiempos de esterilización
Contando desde que la olla alcanza la máxima presión.
Grano: Una hora y media.
Pasteles PFTek: Una hora.
Ágar y agua: de media hora a 45 minutos.
Una vez que pase el tiempo apagamos el fuego y dejamos enfriar los tarros dentro de la olla hasta que vuelvan a temperatura ambiente.
Esterilización con olla a presión All American
Aquí se explica como esterilizar grano de trigo con olla a presión All American: https://lisergia.org/tutoriales/preparacion-del-grano-de-trigo.63/
Excelente hilo en Shroomery donde explican paso a paso y con fotos como construir una buena caja de aire inmóvil. Imprescindible para realizar transferencias G2G, trabajo con ágar y muy conveniente para inocular y realizar todo tipo de procesos que requieran un ambiente estéril. El diseño es de Roger Rabbit. Enlace: caja de aire inmóvil en Shroomery.
Antes de empezar a trabajar pulverizamos el interior un desinfectante o con agua con unas gotas de jabón. Cerramos completamente y esperamos 30 minutos. Entre cada inoculación en un tarro, se saca fuera la jeringa y se pone al rojo vivo a la llama de un mechero de alcohol, introduciendo la jeringa en la caja mientras la aguja sigue al rojo. Esperamos a que enfríe y reanudamos el proceso, podemos enfriarlo expulsando un poco de agua con esporas, hay que tener en cuenta que el primer chorro que sale, si la aguja está muy caliente matará las esporas. Es importante tener fuera el mechero de alcohol ya que si usamos alcohol para desinfectar, la caja se convertirá en un lanzallamas.
Aquí podemos ver como se usa esta caja para transferencias G2G (grain to grain):
http://www.youtube.com/watch?v=jDIIl84UhWU
Desinfectante quirúrgico
Estas recetas llevan tiempo circulando por internet y son efectivas.
Receta 1
- 1 parte de agua destilada.
- 1/2 parte de alcohol 96.
- 1/4 parte de agua oxigenada.
- 1/8 parte de betadine.
Receta 2
- 90% agua destilada.
- 10% lejía.
Estas mezclas van muy bien para pulverizar la glovebox, donde previamente hemos puesto todo el material que necesitamos para hacer el proceso, siendo conveniente esperar al menos 10 minutos (aunque mejor 30) para que haga efecto.
También tenemos la opción de usar desinfectante quirúrgico. Para su correcto uso se recomienda frotar sin diluir con las manos secas, asegúrandose de que las manos quedan completamente cubiertas durante el tiempo de aplicación. Mantener una atención especial a los dedos y los pulgares. Es efectivo contra un amplio rango de microorganismos y virus.
Enlace de compra del desinfectante quirúrgico.
Este método, aunque no es tan bueno como usar una olla a presión o autoclave, es perfectamente válido, aunque funciona con grano de arroz sólo se recomienda para vasos PFTek (harina de arroz con vermiculita). Es conveniente dejar el grano en agua previamente a la esterilización durante 24 horas para que germinen las endoesporas y éstas no resistan la esterilización.
Sellado de los vasos
Una vez que tenemos el sustrato listo para esterilizar lo echamos en los vasos sin llenar del todo. Cubrimos la boca del vaso con papel de aluminio, echamos algo de vermiculita seca y ponemos otra nueva capa de papel de aluminio. Esta técnica es conocida como Sello Ramsey y ayuda a prevenir contaminaciones a la hora de inocular.
Es importante que el vaso quede bien cerrado para que no entre agua durante el proceso.
Esterilización
Preparamos una olla normal y corriente poniendo un trapo en el fondo para evitar que se rompan los vasos al hervir, colocamos los vasos y echamos agua, comprobando que el nivel del agua cubra el nivel del sustrato de los vasos. Es posible que tengamos que rellenar con un poco de agua hirviendo cuando pase una hora aproximadamente para que el nivel no baje demasiado. Se debe estar al tanto para evitar que salgan ardiendo los trapos.
Cubrimos con una tapa, lo dejamos una hora y cuarto – hora y media al baño maría, apartamos del fuego, sacamos los vasos y los dejamos enfriar completamente antes de inocular. Es importante que se terminen de enfriar, dependiendo del tamaño de estos pueden estar frios al tacto por fuera mientras que el sustrato está demasiado caliente, matando las esporas.
Para esterilizar grano se recomienda un tiempo de 8 horas, teniendo una olla con agua caliente accesoria para ir rellenando conforme se evapore, aunque siempre es mejor esterilizar con olla a presión.
